1醬油蛋白質(zhì)、淀粉類(lèi)物質(zhì)快速水解

全氮、氨氮是國標CB 18186—2000《釀造醬油》中規定判定醬油等級好環(huán)的關(guān)鍵指標。因此，快速將醬醪中的全氮、氨氮提升的到一個(gè)較高水平是完成醬油快速發(fā)酵的一個(gè)前提條件。

醬油蛋白質(zhì)、淀粉類(lèi)物質(zhì)的水解主要依靠的是在制曲過(guò)程中曲霉類(lèi)細菌分泌的一些蛋白酶類(lèi)、淀粉酶和糖化酶等酶物質(zhì)，經(jīng)過(guò)這些一系列的酶的生物酶解過(guò)程實(shí)現的^[5]。除了進(jìn)行正常的曲霉培養外，通過(guò)工藝參數控制以達到酶的gao效性和持久性是實(shí)現蛋白類(lèi)、淀粉物質(zhì)快速分解的*有效和*直接的途徑^[6]。眾多科研機構和與醬油類(lèi)相關(guān)的企業(yè)在這方面都做了很多研究，而且“低鹽固態(tài)”醬油發(fā)酵工藝*是通過(guò)工藝參數控制達到蛋白類(lèi)、淀粉類(lèi)物質(zhì)快速水解的*直接體現^[7]。下面*關(guān)于影響快速水解醬醪中的蛋白類(lèi)、淀粉類(lèi)物質(zhì)的因素及其控制條件進(jìn)行一個(gè)整體總結性探討。

1.1發(fā)酵PH的影響

米曲老老霉分泌的蛋白酶系中，中性蛋白酶和堿性蛋白酶占蛋白酶系的90%以上，酸性蛋白酶所占比例很小，因此在發(fā)酵前期控制中，合適的PH值是保證蛋白酶活的一種有效措施，李秀婷等^[9]對米曲霉酶系的影響條件也進(jìn)行了細致討論，其中對PH值對米曲霉系的影響分析與于超相同。一般情況下，在前期醬醪的PH值隨發(fā)酵延長(cháng)而慢慢降低，在后期的PH值已經(jīng)不適合蛋白酶系保持gao效的酶活，因此在前發(fā)酵期，通過(guò)檢測PH值并通過(guò)NAOH等物質(zhì)人工控制PH值達到蛋白類(lèi)物質(zhì)快速分解是比較好的方法。

1.2溫度的控制

溫度對蛋白質(zhì)類(lèi)快速水解的影響是非常明顯的，“低鹽固態(tài)”以及后期衍生出來(lái)的淋澆醬油發(fā)酵式藝中，比較明顯的特點(diǎn)*是在（部分）發(fā)酵過(guò)程中有一個(gè)比較高發(fā)酵溫度的過(guò)程。

在米曲霉所分泌的酶系中，蛋白酶的*佳酶活溫度在40—45℃，而淀粉酶的*佳酶活溫度更高，在50-55℃。童永增^[10]對早先對發(fā)酵溫度與*終蛋白分解的關(guān)系進(jìn)行較系統的對比。

在蛋白酶*佳酶活溫度范圍內，蛋白質(zhì)水解情況*好。

從現實(shí)生產(chǎn)情況看，醬油發(fā)酵中蛋白質(zhì)的快速不解還與原料破碎、水分等諸多因素相關(guān)，一些工廠(chǎng)甚至通過(guò)嘗試外源添加蛋白酶、淀粉糖化酶來(lái)達到蛋白質(zhì)類(lèi)、淀粉類(lèi)物質(zhì)的水解^[11]但總體來(lái)說(shuō)，PH值的良好控制以及前期溫度參數的良好調控均可快速達到蛋白水解的目的，該方法已經(jīng)在很多區域得到了實(shí)際應用效果。陶文沂等^[12]在發(fā)酵溫度與酶活性及醬油風(fēng)味（主要是氨基酸風(fēng)味）的研究中，*終得到了前高溫、后低溫的發(fā)酵工藝在對鮮味氨基酸增加、苦味氨基酸減少都得到了很好的效果。

2醬油快速增香

通過(guò)對工藝參數控制等方法，達到蛋白質(zhì)類(lèi)、淀粉類(lèi)物質(zhì)的快速水解，目前在很多醬油工廠(chǎng)中都得到了很好的應用。然而，更好品質(zhì)醬油不但要求其全氮、氨氮等物質(zhì)達到一定的含量，醬油中濃郁的香氣也是評判醬油質(zhì)量的非常重要的指標。良好的濃郁的香氣的醬油不但可以增加食材的口感，更是可以給食者帶來(lái)一種更好的享受^[13-14].

對于快速的增加醬油的香氣，國內外眾多學(xué)者也做了不少工作，但*國內現況而言，醬油的香氣還是與醬油釀造時(shí)間密切相關(guān)，所謂“時(shí)短則差、時(shí)長(cháng)則優(yōu)”在這里主要說(shuō)的*是在醬油釀造過(guò)程中，釀造時(shí)間短，則香氣、香味不足；釀造時(shí)間長(cháng)，則香氣芬芳濃郁。所以在蛋白質(zhì)類(lèi)、淀粉質(zhì)類(lèi)物質(zhì)快速分解的基礎上，使醬油快速增香，達到長(cháng)時(shí)間釀造醬油的效果，才是醬油快速發(fā)酵工藝的真正目的所在。

醬油的香氣總體上說(shuō)來(lái)源是多方面的，原料種類(lèi)、配合比例、原料處理方法、制曲、發(fā)酵過(guò)程控制、微生物上說(shuō)，醬油香氣是由于曲霉、酵母菌、細菌等的微妙生理作用相互協(xié)調的效果，不僅是物理的化學(xué)的而且是一種復雜生物化學(xué)的綜合作用的結果。醬油工廠(chǎng)往往通過(guò)經(jīng)過(guò)時(shí)間的發(fā)酵，占據了大量的生產(chǎn)設備和流動(dòng)資金，為的*是增加醬油的香和味^[15]。

2.1適宜的香氣產(chǎn)生發(fā)酵條件

國內醬油工藝的發(fā)展與中國近現代歷史發(fā)展有比較直接的關(guān)系，在新中國建立初期的一段時(shí)期，當時(shí)為了滿(mǎn)足國內人民群眾食用醬油的需要，國家開(kāi)發(fā)并推廣了“低鹽固態(tài)”醬油發(fā)酵工藝，該醬油工藝可以在非常短的時(shí)間內釀出醬油，但其高溫特性使這種工藝所釀的醬油在香氣表現上不佳，隨著(zhù)經(jīng)濟發(fā)展和國內生活水品的提高。越來(lái)越多的工廠(chǎng)通過(guò)工藝改進(jìn)，來(lái)解決醬油香氣不足的缺陷，“固態(tài)淋澆”醬油工藝應運而生，為了在香氣產(chǎn)生方面提供一定的條件。在20世紀末期，隨著(zhù)國內需求的進(jìn)一步提升，以日式醬油工藝為基礎的高鹽稀工藝進(jìn)入中國，高鹽稀態(tài)工藝在釀造條件下更適合微生物的生長(cháng)，目前國內的醬油基本 上都是通過(guò)高鹽稀態(tài)工藝長(cháng)時(shí)間釀造得到的^[16-17]。

醬油釀造的本質(zhì)是以多菌種混合發(fā)酵基礎的，通過(guò)物理、化學(xué)、生化等共同作用結果的綜合產(chǎn)物。為了達到多菌種混合發(fā)酵的目的，首先*是要創(chuàng )造適合微生物生長(cháng)作用的環(huán)境。醬油發(fā)酵工藝歷程大致經(jīng)歷了“低鹽固、”“固稀澆淋、”“高鹽稀”三個(gè)階段，其中固稀工藝和高鹽稀工藝是具備多菌種發(fā)酵條件的，避開(kāi)“高鹽稀”工藝不談，目前我國絕大多數企業(yè)還是采用“固稀澆淋”工藝，該工藝發(fā)酵時(shí)間比高稀短，出油快而且在品質(zhì)上要優(yōu)于“低鹽固”工藝。然而，在很多固稀工藝中，由于受到幾十年來(lái)整體發(fā)酵思路的影響，很多工廠(chǎng)在發(fā)酵過(guò)程中還是采用比較高的溫度進(jìn)行控制發(fā)酵，因此，雖然可以使一些耐熱型微生物進(jìn)行繁殖作用，但更多的常規香氣產(chǎn)生微生物（主要以酵母、乳酸菌為主），都無(wú)法進(jìn)行相應的菌體繁殖，導致*終的產(chǎn)品品質(zhì)提升有限。因此，以“固稀澆淋”工藝為例，在保證蛋白分解的條件下，控制PH值、溫度等相關(guān)參數，達到適合微生物代謝的條件對提高*終醬油品質(zhì)有一定的幫助^[18]。

李幼筠等^[19]詳細的論述了我國發(fā)酵調味品與釀造微生物的關(guān)系，其依據中國現有醬油發(fā)酵工藝的現狀對“低鹽固態(tài)發(fā)酵移位淋油”“前固后稀淋澆發(fā)酵原池淋油”3種工藝進(jìn)行了比較和探討，其認為在3種工藝中，第3種工藝*為科學(xué)合理，前期可以在短時(shí)間內，充分利用固態(tài)基質(zhì)熱傳遞耐受性強的特點(diǎn)，實(shí)現短期蛋白、淀粉酶解、呈味、增色；中期使用澆淋方式不但可以調節溫、輸入氧氣、排出有害氣體，以利于微生物生長(cháng)，而且在澆淋過(guò)程中可以適時(shí)補充食鹽，外源添加生香微生物，以利于香氣快速、穩定生成。整個(gè)過(guò)程方便管理，產(chǎn)品品質(zhì)整體達到提升。

2.2外源添加生香微生物快速生香

關(guān)于醬油用微生物，國內外的學(xué)者機構已經(jīng)做了很多研究，WAHTT等^[20-21]對醬油用微生物的作用過(guò)程和影響因素做了詳細的論述。日本是目前公認的醬油生產(chǎn)工藝水平和醬油產(chǎn)品品質(zhì)*高的國家，也是對產(chǎn)香微生物研究較早而且較深入的國家^[22-23]。

與微生物相關(guān)的兩類(lèi)香氣主要來(lái)源：一是通過(guò)微生物本身發(fā)酵得到的一類(lèi)香型物質(zhì)；二是以前一類(lèi)物質(zhì)為前體，通過(guò)復雜化學(xué)或者生化作用合成的其他香類(lèi)物質(zhì)。

在醬油漫長(cháng)的后期發(fā)酵過(guò)程中，全氮、氨氮等很多指標都趨于平衡，后續的這個(gè)過(guò)程主要是微生物生長(cháng)繁殖代謝產(chǎn)生香型物質(zhì)的過(guò)程，是醬油產(chǎn)香的主要階段。在一般醬油釀造過(guò)程中，尤其在產(chǎn)香過(guò)程如，如果不進(jìn)行外源性產(chǎn)香微生物添加，這個(gè)過(guò)程都會(huì )是緩慢而且不確定的，這是由于環(huán)境因素對生物生長(cháng)的不確定性造成的。而外源性添加微生物首先在生物量上可以達到一個(gè)較高水平，使其在短時(shí)間范圍內開(kāi)始產(chǎn)香生物過(guò)程。目前以日式醬油為代表的醬油釀造工藝普遍添加2種微生物，耐鹽型乳酸菌和耐鹽型酵母菌。乳酸菌主要用于前期產(chǎn)酸及醬油PH值優(yōu)化，對優(yōu)化醬油口感有輔助作用^[24]。而關(guān)于外源添加微生物產(chǎn)香，*具代表性的*是耐鹽酵母菌的添加。

耐鹽性酵母是在整個(gè)醬油釀造中對于香氣貢獻*大而且*突出的一類(lèi)微生物，國內外對于耐鹽性酵母對于醬油釀造香氣的貢獻做了大量的研究和報道。日式高鹽稀態(tài)工藝中主要*是以*確的發(fā)酵參數控制以及外源性產(chǎn)香微生物添加，來(lái)*終發(fā)酵獲得更優(yōu)醬油的。趙謀明等^[25]在有關(guān)耐鹽性酵母對醬油香氣的產(chǎn)生中，明確了醬油酵母在諸多香氣物質(zhì)如乙醇、苯乙醇、3-甲基丁醇等的貢獻。魯緋等^[26-27]非常系統的闡述了耐鹽酵母菌對發(fā)酵醬油風(fēng)味作用及其應用，并對耐鹽性酵母的產(chǎn)香物質(zhì)進(jìn)行了比較詳細的介紹。JANSENM等^[28]對影響?hù)斒辖湍干L(cháng)已經(jīng)發(fā)酵的因素作了詳細的討論。

添加外源生香微生物對于其他香型合成也具有非常明顯的促進(jìn)作用。其原理以添加耐鹽性酵母為例，耐鹽性酵母不但本身經(jīng)過(guò)生物作用合成了大量的香氣物質(zhì)，而且這些香氣物質(zhì)也會(huì )生成為其他香型物質(zhì)合成的前體，根據勒夏特列原理，前體反應物增多，則加速反應進(jìn)行，因此其他香型物質(zhì)的產(chǎn)生速率也會(huì )隨之加快。如在醬油釀造過(guò)程中加入耐鹽性酵母后，醬醪中的乙醇含量在短時(shí)間內有比較高的提升，而乙醇正是很多香型物質(zhì)（包括非生物酶反應和生物酶反應）的合成前體，乙醇含量的提高可以促進(jìn)這些反應進(jìn)行，從而達到香型物質(zhì)的整體提升。目前在醬油釀造過(guò)程中已被公認的通過(guò)添加魯氏酵母和球擬酵母可以有效的提高醬油品質(zhì)。

除了在快速提高香氣上面有明確的貢獻以外，外源性添加生香微生物在改善口感、穩定生產(chǎn)等諸多方面都有比較大的貢獻。如現在在許多工廠(chǎng)外源性添加耐鹽酵母，一是在醬油產(chǎn)香方面具有很好的效果；二是酵母菌在生命活動(dòng)中產(chǎn)生的甘油等物質(zhì)可以改善醬油口感；三是優(yōu)勢微生物現象可以很大程度上避免醬油長(cháng)時(shí)間釀造中的染菌危險。因此，外源添加產(chǎn)香微生物是實(shí)現醬油快速發(fā)酵的一個(gè)非常好的方法^[29]。

2.3針對低鹽固態(tài)工藝增香

對于某些醬油廠(chǎng)，其已經(jīng)有低鹽固態(tài)工藝車(chē)間，對產(chǎn)品品質(zhì)有提升需求而又無(wú)法進(jìn)行大范圍設備改造的可以使用此方法。

李琴等^[30]在這方面做了一些探索，通過(guò)在低鹽固態(tài)發(fā)酵工藝生產(chǎn)的二油、三油中外源添加魯氏酵母和球擬酵母，通過(guò)對二油和三油進(jìn)行二次發(fā)酵對二油和三油中的香型物質(zhì)進(jìn)行提升，之后將二油、三油的二次發(fā)酵油與頭油進(jìn)行配兌，已達到提升產(chǎn)品品質(zhì)的作用。通過(guò)這種方法可以在一定程度上提升醬油的品質(zhì)。

3結語(yǔ)

醬油是中國飲食文化的結晶，無(wú)論從過(guò)去、現在還是未來(lái)，醬油都會(huì )伴隨一代代人繼續隨著(zhù)中國的歷史繼續走下去，作為現代的“民以食為天”，通過(guò)合理的工藝改進(jìn)，充分利用醬油釀造微生物快速釀造出更好品質(zhì)的醬油，讓人民群眾獲得高質(zhì)量的飲食體驗，是義不容辭的義務(wù)和責任。